We are searching data for your request:
Upon completion, a link will appear to access the found materials.
Enzymy restrykcyjne
Wiele bakterii ma enzymy, które rozpoznają określone sekwencje DNA (zwykle 4 lub 6 nukleotydów), a następnie tną dwuniciową helisę DNA w tej sekwencji (rysunek (PageIndex{7})). Enzymy te nazywane są specyficznymi dla miejsca endonukleazy restrykcyjnelub prościej “Enzymy restrykcyjne”, i naturalnie działają jako część obrony bakterii przed wirusami i innymi źródłami obcego DNA. Do cięcia DNA w znanych lokalizacjach naukowcy używają enzymów restrykcyjnych, które zostały oczyszczone z różnych gatunków bakterii i które można nabyć z różnych źródeł komercyjnych. Enzymy te są zwykle nazywane od bakterii, z której zostały po raz pierwszy wyizolowane. Na przykład, EcoRI oraz EcoRV czy oba enzymy pochodzą z E coli. EcoRI tnie dwuniciowy DNA w sekwencji GAATTC, ale zauważ, że ten enzym, podobnie jak wiele innych, nie tnie dokładnie w środku sekwencji restrykcyjnej (rysunek (PageIndex{8})). Końce cząsteczki przecięte przez EcoRI mają wystający region jednoniciowego DNA, dlatego są czasami nazywane lepkie końce. Z drugiej strony, EcoRV jest przykładem enzymu, który tnie obie nici dokładnie w środku swojej sekwencji rozpoznawczej, tworząc coś, co nazywa się tępe końce, które nie mają zwisów.
Ligacja DNA
Proces DNA ligacja występuje, gdy nici DNA są połączone kowalencyjnie, od końca do końca dzięki działaniu enzymu zwanego DNA ligaza. Mówi się, że cząsteczki z końcami lepkimi z komplementarnymi wystającymi sekwencjami mają kompatybilne końce, co ułatwia ich łączenie w rekombinowany DNA. Podobnie, dwie sekwencje z tępymi końcami są również uważane za kompatybilne do łączenia się ze sobą, chociaż nie łączą się one ze sobą tak skutecznie, jak lepkie końce. Uwaga: cząsteczki z końcami lepkimi o niekomplementarnych sekwencjach nie będą ligować razem z ligazą DNA. Ligacja ma zatem kluczowe znaczenie dla wytwarzania rekombinowanego DNA, w tym wstawiania dwuniciowego fragmentu DNA do wektora plazmidowego.
Bardzo mi przykro, że nie mogę ci w niczym pomóc. Ale jestem pewien, że znajdziesz właściwe rozwiązanie.
What nice idea
Nie masz racji. Mogę to udowodnić. Napisz w PM, omówimy.
dobra informacja
Wszystkie zdjęcia są po prostu okropne